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CCK-8细胞增殖及毒性测试试剂盒 …

产品编号: CC440087A/CC440087

产品包装: 100T/500T

产品价格: 240元/720元

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产品简介:        
    Cell Counting Kit-8简称CCK-8试剂盒,为MTT法的替代方法,是一种基于WST(水溶性四唑盐,化学名:2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐)的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。可用于药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏等试验。

使用说明:     
一. 制作标准曲线(测定细胞具体数量时)
1. 先用细胞计数板计数所制备的细胞悬液中的细胞数量,然后接种细胞。 
2. 按比例依次用培养基等比稀释成一个细胞浓度梯度,一般要做3-5个细胞浓度梯度,每组3-6个复孔。
3. 接种后培养至细胞贴壁,然后加CCK-8试剂培养一定时间后测定OD值,制作出一条以细胞数量为横坐标(X轴),OD值为纵坐标(Y轴)的标准曲线。根据此标准曲线可以测定出未知样品的细胞数量(试用此标准曲线的前提是实验的条件要一致,便于确定细胞的接种数量以及加入CCK-8后的培养时间。) 

注意事项:           
①建议先做几个孔摸索接种细胞的数量和加入CCK-8试剂后的培养时间。 
②白细胞可能需要培养较长时间。 
③当使用标准96 孔板时,贴壁细胞的最小接种量至少为1 ,000个/孔 (100µL培养基)。检测白细胞时的灵敏度相对较低,因此推荐接种量不低于2,500 个/孔 ( 100µL培养基)。如果要使用24孔板或6孔板实验,请先计算每孔相应的接种量,并按照每孔培养基总体积的10% 加入CCK-8溶液。 
④如果没有450nm的滤光片,可以使用吸光度在430-490 nm 之间的滤光片,但是450nm检测灵敏度最高。 
⑤培养基中酚红的吸光度可以在计算时,通过扣除空白孔中本底的吸光度而消去,因此不会对检测造成影响。