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DNAase I柱上消化试剂盒(RNase …

产品编号: CC9730

产品包装: 50T

产品价格: 250元

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  • 产品简介
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产品储存:DNase Buffer -20℃保存,去蛋白液RW1常温或者4℃保存,RNase free DNase -20℃保存,避免反复冻融。
 
产品介绍:任何总RNA提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA的微量残留,本公司的EASYspin系列RNA提取产品,由于采取了本公司独特的缓冲体系和特殊硅胶吸附膜,可以去除绝大多数的DNA污染,所以一般不用进行DNase I消化。但是对于一些敏感的下游实验,需要去除微量的DNA残留,可以购买本公司DNase I柱上消化试剂盒(RNase free),直接在离心吸附柱上面消化残留的DNA,然后纯净RNA可以洗脱下来直接使用。本产品兼容所有硅胶膜离心柱式RNA提取试剂盒。
 
产品特点:
    1. 简单快速,条件经过优化,一般15分钟可以消化清除硅胶膜上残留DNA。
 2. 确保RNase free,可以保证RNA分子完整性。
3. 兼容性广,可整合进所有硅胶膜离心柱式RNA提取试剂盒柱上消化,不需要提取到总RNA后再单独去除里面的残留DNA。
 
注意事项:DNase是非常敏感,易物理损坏变性丧失活性,所以不要漩涡混匀DNase I和工作液。轻轻吹打或者上下颠倒混匀混合液。每次在抽提RNA抽提前配置新鲜的工作液。DNase I buffer是和RNase-free DNase I 配套专门用于柱上消化,一般的10×DNase buffer并不能用于膜上的DNase消化,不能替代。

 

操作步骤:
1. 按照正常RNA提取步骤操作,裂解混合物过柱离心完全后(RNA包括残留DNA吸附到离心柱硅胶膜上),加入去蛋白液RW1步骤前按照以下步骤操作。
 
2. 取45ul DNase I buffer和5ul RNase free DNase I离心管轻轻吹打混匀成工作液(处理多个离心柱子要按照比例放大制备工作液)。
注:如果残留DNA过多导致消化不完全,可按比例加大使用酶量来提高消化效果(如90ul DNase I buffer和10ul RNase free DNase I)。
 
3. 向吸附柱RA中加入350ul去蛋白液RW1,12,000rpm离心30秒,弃废液,将吸附柱放回收集管中。
 
4. 向吸附柱RA中央加入50ul的DNase I工作液,室温(20-30℃)放置15分钟。注意直接将工作液滴在膜中央上,不要让工作液滴在O型圈或是离心柱管壁上。
 
5. 向吸附柱RA中加入350ul去蛋白液RW1,12,000rpm离心30-60秒,弃废液,将吸附柱放回收集管中。
 
6. 接漂洗液RW步骤等后续步骤。如果是其它公司试剂盒,则接最后的一个漂洗液漂洗等后续步骤。