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病毒基因组DNA/RNA快速提取试剂盒…

产品编号: CC9732

产品包装: 50T

产品价格: 990元

说明书下载
  • 产品简介
  • 使用说明
  • 产品图片

 

试剂盒组成、储存、稳定性:

试剂盒组成
保存
50
裂解液VLB
室温
20 ml
去蛋白液RE
室温
25 ml
漂洗液RW
室温
10 ml
第一次使用前按说明加指定量乙醇
RNase-free H2O
室温
10 ml
吸附柱RA和收集管
室温
50 套

室温储存 12 个月不影响使用效果,各溶液使用后应及时盖紧盖子。
 
产品介绍:采用特异性结合病毒 DNA/RNA的离心吸附柱和独特的缓冲液系统,病毒DNA/RNA提取试剂盒适合于从无细胞体液,包括血浆、血清、腹水、培养细胞上清液、脑脊髓液及尿液等中快速提取高纯的病毒DNA/RNA。该产品可以满足绝大多数的病毒RNA/DNA的同时提取要求,如病毒 RNA:HCV(丙肝病毒),HIV(艾滋病毒),和HTLV(人类嗜 T 淋巴细胞病毒);病毒DNA:HBV(乙肝病毒)和CMV(巨细胞病毒)等等。病毒裂解后,DNA/RNA后在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤,将盐、细胞代谢物、蛋白等杂质去除,最后低盐的洗脱缓冲液将纯净的病毒DNA/RNA从硅基质膜上洗脱。纯化后的病毒核酸无杂质和PCR抑制剂,可直接适用于PCR/RT-PCR分析。
 
产品特点:
1. 不需要使用有毒的苯酚等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。
2. 节省时间,简捷,单个样品操作一般可在20分钟内完成。
3. 多次柱漂洗确保高纯度,提取的病毒DNA/RNA纯度高,质量稳定可靠,可适用于各种常规操作,包括 PCR/RT-PCR、酶切、测序、Southern杂交等。

 

操作步骤:(实验前请先阅读注意事项)
提示:第一次使用前请先在10ml 漂洗液RW中加入40ml 无水乙醇,充分混匀,加入后请及时在方框打钩标记已加入乙醇,以免多次加入!
1. 200ul血清等体液(需回复到室温,不足可用 0.9% NaCl或者PBS补足)转入上述1.5ml离心管,加入400ul裂解液VLB,立刻涡旋振荡充分混匀
 
2. 室温(15-25℃)放置10分钟,每隔5分钟,振荡混匀一次。
 
3. 加入450ul无水乙醇,立刻涡旋振荡充分混匀
如果周围环境高于25℃,乙醇需要冰上预冷后再加入。
 
4. 将上述混合物加入一个吸附柱RA中,(吸附柱放入收集管中)13,000rpm离心30-60秒,倒掉收集管中的废液。
如果总体积超过0750ul,可分两次将溶液加入同一个吸附柱RA中。
 
5. 加500ul去蛋白液RE,12,000rpm离心30秒,弃废液。
 
6. 加入500ul漂洗液RW(请先检查是否已加入无水乙醇!),12,000rpm 离心30秒,弃废液,加入500ul漂洗液 RW,重复一遍。
 
7. 将吸附柱RA放回空收集管中,13,000rpm离心2分钟,尽量除去漂洗液,以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。
 
8. 取出吸附柱RA,放入一个RNase free的离心管中,在吸附膜的中间部位加30-50ul RNase free H20(事先在     65-70℃水浴中加热效果更好),室温放置1分钟,12,000rpm离心1分钟。如果想得到较多量的DNA,可将得到的溶液重新加入离心吸附柱中,12,000rpm离心1分钟。
洗脱体积越大,洗脱效率越高。如果需要DNA/RNA浓度较高,可以适当减少洗脱体积,但是最小体积不应少于20ul,体积过小降低洗脱效率,减少DNA/RNA产量。
 
9. DNA病毒可以存放在2-8℃,如果要长时间存放,可以放置在-20℃。RNA病毒建议最好立刻使用,否则立刻短期放置在-70℃备用。