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RNAfixer无液氮RNA样品储存液  C…

产品编号: CC9735

产品包装: 50ml/100ml

产品价格: 280元/450元

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  • 产品简介
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产品编号:CC9735                          
包装单位:50ml、100ml
 
产品储存和稳定性:透明液体,室温(18-25℃)保存期限为12个月,如果使用时发现有沉淀或者析出,可以在37℃加热重新溶解后使用,不影响产品质量。
 
产品介绍:适用于动物组织(心,肝,肾,肌肉,睾丸,脑,脾等)、培养细胞、RNA病毒、果蝇、细菌、白细胞、全血、一些植物组织等。
RNAfixer是一种水相的,无毒的组织保存液体,可以迅速渗入新鲜组织细胞的胞浆中,在非冻状态下原位稳定和保护细胞内的RNA。取下组织薄片后立刻浸入RNAfixer保存并不影响将来提取RNA的质量和数量。RNAfixer 消除了RNA样品需要立刻处理或者必须液氮保存的不方便。浸入RNAfixer后,新鲜组织细胞中RNA可以完好的在 37℃下保存一天,在 25℃下保存一周,4℃下保存一个月,在-20℃或-80℃下长期保存。RNA病毒样品(如 HCV        和 HIV)可在 37℃保存一个月。
 
产品特点:
1.操作容易:将组织剪成适当大小,浸没在RNAfixer中即可使其RNA不被降解。
2.无需液氮:使样品的保存不需液氮,干冰或-80℃冰箱,尤其适用于临床和野外样品的快速和大规模采集。
3.方便运输:处理过的样品能在25℃保存一周,使样品邮寄和运输变得容易和便宜,有利学术合作和交流。
4. 多次冻融:经RNAfixer处理的样品可反复冻融多次,其间可对样品进行各种处理而不影响最终提取的RNA            的质量。
5. 可比性强:RNAfixer能减少大规模样品处理中的误差,增加各次实验数间的可比性,对大规模基因表达谱的分析尤其有用。
6. 兼容性广:多种RN提取试剂都可以用来提取保存在RNAfixer内的样品。还可直接用于组织切片,免疫学和流式细胞分析而不影响RNA提取的质量。

 

如何使用RNAfixer:RNAfixer只用于新鲜组织,浸泡入RNAfixer前禁止冷冻组织。只需要迅速将新鲜组织剪成长,宽,高任意一边厚度<0.5厘米浸泡入RNAfixer即可(只要有一边厚度不超过0.5厘米,RNAfixer可以迅速渗透,其它两边的尺寸并不重要)。将新鲜组织浸泡在5倍体积的RNAfixer中,按照指示存放在适当的温度。
1. 动物组织
RNAfixer并不破坏或者溶解组织结构,因此浸泡在RNAfixer中达到渗透平衡的组织可以从RNAfixer中取出,然后切成更小的块,然后放回到RNAfixer中下次继续使用。小器官如小鼠肝,肾,和脾不需要剪切,可以完整的存放在RNAfixer中。
 
2. 植物组织
很多植物组织直接浸泡入RNAfixer即可,有的植物有天然渗透屏障如腊质保护层,需要先破坏掉腊质层,便于RNAfixer渗透。
 
3. 组织培养细胞
细胞吹打下来后,离心收集细,弃上清,用冰浴的PBS缓冲液洗一次去除残留培养液。将细胞悬浮在少量PBS缓冲液中。加入五到十倍体积RNAfixer,混均。
 
4. 血和血浆
和红细胞和血清分离的白细胞可以和组织培养细胞一样的保存。RNAfixer也可以保存抗凝全血,血清和血浆。对于全血加入3倍体积RNAfixer,混匀。
 
5. 酵母
离心收集3×108的细胞(>12,000g离心两分钟),立刻将细胞团重悬在0.5–1ml的RNAfixer中。酵母细胞可以保存在RNAfixer中25℃8小时或者4℃一个星期。如果要保存存更长时间,将酵母细胞在RNAfixer中放置一个小时后,再次于>12,000g离心5分钟,将酵母细胞团放入液氮瞬时冷冻后放置于–80℃储存。
 
6. 细菌
细菌并不能在RNAfixer中生长,但是RNAfixer并不破坏细菌,E.coli在4℃保存一个月仍旧可以提出完整的RNA。
 
RNAfixer中样本的存放:
1. 存放在–80℃
文档样品长期保存用。将RNAfixer中样本放置于4℃过夜,然后将样本捞出,尽量去除干净RNAfixer液体,然后放置于–80℃。对于组织培养细胞,则不需要去除RNAfixer,直接冷冻于–80℃,并不会裂解细胞。样品使用时可以在室温融化,并且还可以再次冷冻而不影响RNA的完整性和产量。
 
2. 存放在–20℃
将RNAfixer中样本放置于4℃过夜,然后转移到–20℃。在–20℃样品并不会被冰冻,但是可能会形成一些结晶,这并不会影响将来的RNA提取。样品使用时可以在室温融化,并且还可以再次冷冻而不影响RNA的完整性和产量。
 
3. 存放在 4℃
样本可以在4℃存放一个月。
 
4. 存放于 25℃
存放于25℃样本的RNA在一周内保持完整,保存两周的样品RNA有轻微降解,勉强能用于northern analysis, 但是质量足够用于nuclease protection assay or RT-PCR analysis。
 
5. 存放于 37℃
存放于37℃样本的RNA在24小时内保持完整,3天的时候有部分降解。
 
RNAfixer保存样本的RNA提取:
将样本从RNAfixer中取出,RNAfixer可以直接倒入水池,用自来水冲即可,不需特殊处理。
1. 组织
用干净镊子将样本从RNAfixer中捞出,用吸水纸稍稍吸去残留的RNAfixer后,可以和新鲜组织一样按照液氮研磨,然后匀浆处理的标准程序进行提取RNA。
 
2. 细胞
对于储存在RNAfixer中的细胞有两种选择。一是去除RNAfixer后提取RNA,另一个是直接从细胞和RNAfixer的混合物提取。
1)去除RNAfixer后提取 RNA存放于RNAfixer中的细胞变得不那么脆弱,可以承受较高的离心速度而不被裂解。我们有在5000g离心成功收集细胞的经验,由于每种细胞的强度不一样,可以先用不重要的细胞做个预试验,以保证在使用的速度下离心不会破坏细胞。另一个选择是在离心前加等体积的PBS稀释RNAfixer和细胞的混合物,以减少溶液的密度,使细胞溶液可以沉淀下来。
2)不去除RNAfixer,直接提取RNA也可以直接加10倍体积的一步法提取试剂(如TRIpure,TRI reagent)到细胞和RNAfixer的混合物,然后按照正常步骤操作。