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TUREscript H Minus M-MuLV Reve…

产品编号: CC52701 / CC52702 / …

产品包装: 5000U/10000U/10000U×…

产品价格: 160元/300元/1350元

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TUREscript H Minus M-MuLV Reverse Transcriptase(反转录酶)


储存:-20℃保存。
浓度:200units/μl
制品说明:本制品使用通过基因重组技术克隆表达的点突变型RNase H活性缺失的M-MuLV反转录酶TUREscript Hˉ RTase。野生型的M-MuLV包含的RNase H活性能够催化降解DNA/RNA杂合体中的RNA,因此在cDNA 第一条链的合成反应中可能会降解RNA/DNA杂合体中的模板RNA。本酶M-MuLV(RNase Hˉ)的RNase H活性缺失,与M-MuLV 相比,具有更强的延伸能力和稳定性,可用于较长的cDNA合成以及高比例的全长cDNA文库的构建等。
适用范围:第一链cDNA合成。可用于低拷贝基因的检测。
特点:合成cDNA片段长度最高可达12kb。

第一链cDNAcDNA合成(以20μl反应体系为例)

2. 轻轻混匀
如用Oligo(dT)18或基因特异引物(GSP),42℃孵育50min。
如用Random Primer,25℃孵育10min,42℃孵育50min。
3. 65℃加热15min失活TUREscript Hˉ RTase。

RT-PCR
建议取1/10-1/5体积(2-4μl)的反转录产物作为PCR模板。


注意事项:
1. 避免RNase污染。
2. 为保证反转录成功建议使用高质量的RNA样品。
3. 如果RNA模板GC含量丰富或者有复杂二级结构,可以先只加RNA模板、引物和和RNase free H2O混匀,65℃变性5分钟,冰上冷却,短暂离心后加入其它成分继续下面的反转录步骤。