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鼠尾PCR直接扩增试剂盒DirectAmp…

产品编号: CC53801 / CC53802

产品包装: 100次/500次

产品价格: 700元/2800元

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  • 使用说明
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 DirectAmp Mouse Tail PCR Kit鼠尾PCR直接扩增试剂盒 

Components
CC53801
CC53802
Buffer AD1
0.75ml
3.75ml
Buffer AD2
7.5ml        
37.5ml
2×DirectAmp PCR Mix
1ml
5ml
ddH2O(PCR grade)
10ml
50ml

 








产品储存:
2×DirectAmp PCR Mix -20℃保存,避免反复冻融次数过多,3周内短时间使用可放4℃保存。其余常温或者4℃保存,有效期12个月。

制品说明:本制品采用独特的裂解缓冲液快速裂解鼠尾,释放的DNA无需纯化便可以作为模板,用高度耐抑制物的2 ×DirectAmp PCR Mix扩增,扩增产物可直接上样电泳。

适用范围:
鼠尾、动物组织(哺乳动物,海洋动物,昆虫等)、细胞等。

特    点
:简单,高通量筛选;一般扩增大小<2.5kb。

 

操作步骤:
1. 配制即用裂解液:按10μl Buffer AD1+90μl ddH2O=100μl比例混合配制成即用裂解液。每个样品需要75μl即用裂解液,具体量可以根据样品数量按照比例放大配制即可。即用裂解液可常温存放1个月。
    2. 取75μl裂解液于0.2 mL PCR薄壁管中(没有PCR仪器者也可以用0.5ml离心管)。然后加入1-2mm的鼠尾或者2mm见方的组织(切记不可多加,多加反而抑制下游PCR),样品浸没在裂解液内。
    3. 98℃裂解30min(建议PCR仪上操作),根据情况裂解时间可以在10分钟-1小时内调整。
 4. 取出离心管迅速放冰上,加入75μl Buffer AD2,混匀,即可直接用做PCR模板或置于4℃或-20℃保存。
 5. PCR扩增:
 
建议PCR条件(以20 μl反应体系为例)

Components
Volume
Final Concentration
裂解混合物模板
1-2μl
as required
2×DirectAmp PCR Mix
10μl
Forward Primer(10μM)
0.4μl
0.2μM each
Reverse Primer(10μM)
0.4μl
0.2μM each
ddH2O to final volume
20μl
Not applicable
 


注意事项:
1. 如果扩增条带较弱,可以适当增加或者减少模板加入量,裂解混合物模板一般可以在1μl-4μl内调节。
2. 如果非特异扩增较多,可调整退火温度,或者适当增减模板用量。
3. 各溶液使用完毕后,应该立刻盖紧盖子,以免PH改变影响质量。