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DNAeraser基因组DNA污染清除剂  …

产品编号: CC9743

产品包装: 50ml

产品价格: 600元

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产品介绍:很多用户在提取RNA的时候由于操作因素或者RNA抽提试剂质量问题,造成所得到的RNA样品中混杂基因组污染,在普通或者变性电泳的时候直接肉眼可见程度不一的DNA污染杂带。即使用市售的RNase-free的DNase消化DNA也不容易清除完全,而且常常导致RNA降解。DNAeraser基因组DNA污染清除剂不含DNA酶,在强烈抑制RNA酶的条件下彻底清除RNA样品中的污染DNA杂带和蛋白质污染,同时进一步纯化RNA。最后通过异丙醇沉淀回收的RNA纯度极高,完全不影响原有RNA质量和下游应用。
 
产品储存:4℃避光。
 
产品用途:非酶法清除RNA样品中的基因组DNA污染。每ml试剂处理~100μg RNA样品。

 

操作方法:根据起始RNA溶液的体积,按比例加入所需试剂。以下操作以100μl RNA溶液为例。除非RNA溶液中RNA浓度很低,为方便操作可用DEPC处理水将不足100μl的RNA样品的体积补充到100μl。
1. 每100μl RNA溶液加入1ml基因组DNA污染清除试剂。充分振荡混匀,冰上放置1分钟。
 
2. 加入自备的氯仿200μl,充分振荡混匀,冰上放置1分钟。
 
3. 12000rpm低温离心10分钟。
 
4. 取上清约600μl转移到新管。应留下少量上清勿触动中间相,否则重新离心。
 
5. 可选步骤:加入核酸助沉剂Acryl Carrier(货号:CC440020)2μl,充分混匀。加入核酸助沉剂后RNA特别是低浓度RNA的回收率显著增加,并使RNA沉淀容易辨认。核酸助沉剂不影响RNA及其下游实验。如果原样品的RNA浓度较高,可以省略此步骤。
 
6. 加等体积的异丙醇,充分混匀,室温放置5-10分钟。
 
7. 12000rpm低温离心10分钟。弃上清。
 
8. 加1ml 75%乙醇,振荡洗涤沉淀。12000rpm低温离心3分钟。弃尽上清。
 
9. 敞开管口,空气干燥RNA沉淀(注意不要干燥过头,否则RNA沉淀极难溶解,但是也不能残留太多乙醇,否则抑制下游反应)。
 
10. 加入适量RNase free water或者DEPC处理水溶解RNA沉淀。1%普通琼脂糖凝胶电泳检查RNA。